产品货号：
JN5122
中文名称：
DpnI限制性内切酶
英文名称：
产品规格：
1kU|5kU
发货周期：
1～3天
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本制品是克隆自肺炎双球菌（Diplococcus pneumoniae）G41（S.Lacks）的DpnI基因表达的蛋白，是一种限制性内切酶，可选择性地识别切割甲基化的GATC位点，只有当识别位点被甲基化时，DpnI才能酶切，基于其甲基化敏感特性，可以专一性降解dam+质粒DNA。
本制品具有强特异性，可针对其识别的DNA序列进行特异性切割，识别序列如下：
5'…G Am6▼T C…3'
3'…C T ▲Am6G…5'
3'…C T ▲Am6G…5'
- 分子克隆；
- PCR反应后质粒模板的去除；
- Southern杂交；
- 基因分型；
- 限制性片段长度多态性(RFLP)。
| 组分 | 1kU | 5kU |
| DpnI (20U/μL) | 50μL | 250μL |
| 10×RE Reaction Buffer | 250μL | 1.25mL |
保存：-20℃，有效期1年。
酶活定义
一个单位是指在50μL的总反应体系中，37℃条件下，1小时内酶切1μg pBR322 DNA（dam甲基化）所需的酶量。
- DpnI裂解完全腺苷甲基化的位点较快，而半腺苷甲基化的位点的裂解速度要慢60倍，不裂解未甲基化的位点。从dam+菌株纯化而来的DNA才是DpnI的酶切底物；
- DpnI对dam或哺乳动物CpG甲基化敏感，不能切割哺乳动物gDNA中被重叠CpG甲基化阻断的识别位点；
- DpnI的同裂酶有MalI；
- DpnI依赖于二价金属离子，DpnI在Mg2+或Mn2+存在下具有活性，但在Ca 2+离子存在下不具有活性；
- 尽量减少酶暴露在-20℃以上的时间。
- 推荐反应体系：
成分 用量 10×RE Reaction Buffer 5μL DNA 1μg DpnI 1μL RNase-Free Water 至50μL - 反应条件：37℃，反应1～3小时。
- 热失活：反应完成后65℃孵育20min可终止反应。
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